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对于培养基而言,我们已经唠说过了完全培养基,也就是营养培养的。
之后还有选择培养基,咱俩用尿素的细菌一块唠一唠。
鉴别培养基是如何应用与操作的呢?
对于。细菌的计数而言,我们必须使用稀释涂布平板。这样我们才可以对细菌的数量进行具体的操作与计数。
而且菌落的个数则是在30到300之间的平进行计数,这样可以有效的减少一些不必要的误差影响。
在操作时为了防止一些不必要的操作造成的误差,我们需要在一个相同的稀释倍数下设置最少三个培养基。并且取这些培养基上菌落的平均值。
在统计和记录的过程中,我们还需要设置一个空白对照,这样可以提高实验的可信度,排除培养基被污染的因素。
对于细菌菌落的计数有哪几种方法呢?
大体可以分为两种方法:
第一种是直接计数法,这种计数法。会比实际菌落数目要低,因为会有多个细胞连接在一起时,在平板儿上看到的只能是一个菌落而无法区分。
第二种方法就是显微镜直接计数法。这种计数法要比实际菌落数要高,因为它不需要进行细菌的培养,而是直接在显微镜下观察。这样无法辨别细菌的死活,如果是死细菌也会被计算在内。因此会导致所测量的数值比实际多。
之后就要进行具体的操作了。
首先要对尿素细菌的选取的话,我们需要进行土壤取样,正常来说是选择距地面3到8厘米处的土壤这样的土壤,还有细菌的数目,通常来说会比较丰富。
之后,我们需要将样品进行稀释。在稀释时,要选择以梯度稀释为原则,这样可以有效地控制数目,而且能明确稀释倍数,便于结束。
最后我们就需要进行培养和观察。
观察时要注意细菌的形状,大小,颜色还有菌落的溶解程度等。操作中需要注意的一些事项有:
一铁锹和信封在使用之前需要进行灭菌,防止铁锹和信封上存在的细菌对我们的实验结果造成影响与干扰。
二取土壤时,要在酒精灯火焰旁盛取。
三培养皿放置时需要倒置,并且要把培养皿的皿底上注明培养基的种类、培养日期、稀释度等,这样可以便于日后可以明确具体对内容与信息的了解。
四尿素分解菌合成酶的时候,合成的是脲酶。这种细菌可以分解尿素使尿素转化成氨,这时产物遇见酚红指示剂,就可以使指示剂变红。
如果在上回所说的检验大肠杆菌的话,我们需要加入伊红美蓝染色剂。这样操作后,细菌的会变黑,之后也可以用于技术检测了。
培养分解尿素的细菌时,要以尿素为唯一氮源的选择培养基进行培养,这就是鉴别培养基。也是我们需要操作的培养基。
这种培养基的特点就是可以抑制或阻碍其他微生物的生长繁殖,允许特定的生长在这里。因此我们就允许是可以分解尿素的细菌进行生长。
那么我们如何检测,每个样品中的菌落数量,我们就需要用一个公式进行演示:
C×V÷M
这其中,c代表的是某梯度下细菌溶液的浓度
V指板上生长的平均菌落数
M代表的是涂布平板时所需要的稀释度的体积,即m代表稀释度的倍数
一系列的体系操作与注意事项完成,这个实验也就完成了。
这就是选择培养基!有什么想吐槽的,欢迎留言。 圆概念自源其说